聚丙烯酰胺凝膠配置里面有很多的道道,一般人很少涉足,不管是步驟和注意事項都可能影響我們的配置成功幾率,所以,今天盛福萊給大家分享一下聚丙烯酰胺凝膠配置步驟及方法,供大家學習:
聚丙烯酰胺凝膠配制步驟
1.按照要求組裝好垂直電泳版,兩塊玻璃般的底部用1.5%?瓊脂糖封邊,封邊應嚴密,以免聚丙烯酰胺凝膠的膠液漏出。
2.分別量取配比用量的30%丙烯酰胺溶液、5×TBE和超純水置于100?ml燒杯中,用玻璃棒拌勻。
3.用微量加樣器加入配比用量的10%過硫酸銨溶液和TEMED,加入后聚合即開始,迅速搖勻。
4.用玻璃棒引流,將混合液灌注于兩塊玻璃板之間,一次性完成灌膠過程,避免產(chǎn)生氣泡。
5.一次性平穩(wěn)插入樣梳,以形成點樣孔。
6.聚合后,向電泳槽中加入1×TBE緩沖液直至沒過點樣孔,且正負極槽內(nèi)緩沖液高度一致。
聚丙烯酰胺配制注意事項
聚丙烯酰胺易溶于冷水,分子量對溶解度影響不大,但高分子量的酰胺濃度超過質(zhì)量分數(shù)10%以后,會形成凝膠狀態(tài)。溶解溫度超過50度,PAM發(fā)生分子降解而失去助凝作用。因此溶解聚丙烯酰胺時要用45-50度的溫水最為適宜。
配制聚丙烯酰胺溶液一般配成質(zhì)量濃度為0.05-2%,陽離子酰胺粘度較小,可配制成濃度較大的溶液,陰離子酰胺粘度較大,可適當配制成濃度較小的溶液。配制溶液時不可濃度過大,否則不容易控制加藥量,容易造成加藥過量。聚丙烯酰胺的加入量很小,一般加藥量在0.1-2ppm。
聚丙烯酰胺溶液用于處理廢水時,加藥后的絮凝效果與攪拌時間與攪拌有關(guān)。當已經(jīng)形成大塊絮凝時,就不要再繼續(xù)攪拌,否則會使已經(jīng)形成的較大礬花被打碎,變成細小的絮凝體,影響沉降效果。
總結(jié):所以大家在生產(chǎn)制備聚丙烯酰胺凝膠的時候,一定要嚴格按照正確的方法步驟來制備,這樣才能更好的確保制備成功率。